2025-08-14 03:22:36
ICSI技術作為輔助受精的一種手段,在近10年獲得長足發(fā)展。ICSI技術在動物受精機理研究、野生動物遺傳資源保存、拯救珍稀動物和胚胎工廠化生產等方面有著非常廣闊的應用前景。該技術已經成為人類臨床醫(yī)學上***男性不育癥的重要手段,并在全世界得到廣泛應用。盡管ICSI已取得很大成就,但是其存在的問題也不容忽視。首先,由于人為地選擇,動物自身對精子優(yōu)勝劣汰的選擇遭到破壞。這對動物種群的發(fā)展產生的影響還需長期深入的研究。如果能詳細了解精子的表型和基因型之間的關系,相信ICSI技術的可靠性會有所明確。其次,作為胚胎生物技術的一部分。ICSI技術也存在總體效率低的問題,而且胚胎移植后妊娠率低而流產率高亦是目前存在的普遍問題。另外,存在出生動物的死亡和畸形等不良后果。因此要更深入地研究其機理和操作等問題,進一步改善ICSI技術。比如Piezo-ICSI技術就可以有效提高成功率。壓電顯微操作器PMM利用壓電元件產生的驅動力來展示其對各種樣品的優(yōu)異穿孔能力。北京Piezo Micro Manipulator壓電單精子胞漿內注射
壓電式破膜儀的規(guī)范操作需兼顧樣本**與設備精確度,以下為標準流程及注意事項:一、操作前準備設備檢查確認電源接地良好,開機預熱使壓電元件達到熱穩(wěn)定狀態(tài),觀察屏幕顯示參數(shù);安裝適配探頭,擰緊固定螺帽后輕晃探頭,確保無松動(晃動幅度≤0.1mm)。樣本預處理細胞樣本需制備成單細胞懸液,置于無菌培養(yǎng)皿。二、主要操作流程參數(shù)設置根據(jù)樣本類型調節(jié)頻率、振幅(1-5μm)及脈沖時長(10-50ms),建議先在標準微球上測試破膜效率(穿孔率≥80%且無樣本損傷);開啟顯微定向系統(tǒng),通過三維平臺將探頭頂部對準目標區(qū)域(距離樣本0.5-1mm)。破膜操作點“單次脈沖”或“連續(xù)模式”(間隔≥1秒),實時觀察顯微鏡下破膜效果(細胞膜出現(xiàn)短暫透光孔即為成功);破碎時需間歇性操作(每30秒停機冷卻10秒),避免產熱導致樣本變性,同時用移液器輕晃懸液,確保破碎均勻。三、**與禁忌操作禁止行為:探頭未接觸樣本時空載運行;用探頭直接觸碰載玻片或培養(yǎng)皿底部;處理強腐蝕性樣本,否則需額外配置防腐蝕探頭及廢液回收裝置。緊急情況處理:若出現(xiàn)異常噪音(超過60dB)或屏幕報錯(如“振幅超限”),立即按下急停按鈕,斷電后檢查探頭是否卡頓或參數(shù)設置異常。北京Piezo Micro Manipulator壓電單精子胞漿內注射PMM具備快速響應的特點,能夠在短時間內完成實驗操作,減少了操作時間和不確定性。
壓電陶瓷-高聚物復合材料請?zhí)砑訄D片說明無機壓電陶瓷和有機高分子樹脂構成的壓電復合材料,兼?zhèn)錈o機和有機壓電材料的性能,并能產生兩相都沒有的特性。因此,可以根據(jù)需要,綜合二相材料的優(yōu)點,制作良好性能的換能器和傳感器。它的接收靈敏度很高,比普通壓電陶瓷更適合于水聲換能器。在其它超聲波換能器和傳感器方面,壓電復合材料也有較大優(yōu)勢。國內學者對這個領域也頗感興趣,做了大量的工藝研究,并在復合材料的結構和性能方面做了一些有益的基礎研究工作,目前正致力于壓電復合材料產品的開發(fā)。4、壓電性特異的多元單晶壓電體
PMM6建立在一個新的、更小的壓電驅動單元之上,該單元提供:壓電池和微量移液器吸頭之間更有效、更溫和的耦合用戶可調的驅動力更新后的用戶界面經過優(yōu)化,易于使用,包括:觸摸屏,便于操作并顯示當前程序的設置3種可編程操作模式–標準、壓電ICSI和**–允許每個用戶根據(jù)其特定需求平衡操作簡單性與精確控制PrimeTech的PMM6具有新的設計、特性和功能,可提供:“對卵母細胞和操作者都溫和"的精確顯微注射用戶友好的操作,適合初學者和**!PRIME TECH PMM 6可用于DNA注射。
傳統(tǒng)的ICSI是通過授精針刺破卵子,將挑選好的精子注入使之受精。本質上對卵子來說是一種物理性侵入,特別對于幼弱老化的卵子可能會有一定損傷的風險。而全新的壓電式胞漿內單精子注射(Piezo-ICSI)技術,可以減少對卵子的傷害,相較于常規(guī)式的ICSI相比更能提高受精率。Piezo-ICSI超音振動顯微受精法,采用極細(0.908毫米)的平口注射針,比常規(guī)的注射針(1.473mm)細小了將近一半,能夠將卵巢的傷害降到比較低。另一方面,精子注射的過程對卵子的影響也極其重要。Piezo-ICSI技術通過超音振動來打開卵子透明帶再將精子注入,減少了對卵子的損傷,也能夠提高胚胎成功受精的幾率。研究數(shù)據(jù)顯示,以原有的人工授精療法ICSI與Piezo-ICSI進行比較,受精率從83.1%提高到90.3%,細胞**優(yōu)化由84.60%提高到88.10%。PMM 6 MB-D-2中等力度輸出型號,適用于ICSI、ES細胞注射、活檢操作等。上海細胞內膜打孔壓電核轉移
PMM 壓電顯微操作儀提高ICSI成功率。北京Piezo Micro Manipulator壓電單精子胞漿內注射
Piezo-ICSI程序:使用直徑100-mm的細胞培養(yǎng)皿上蓋,準備操作盤;按照Piezo操作系統(tǒng)的要求,將4μL左右的汞從后部裝入注射針中,輕輕將汞推至針尖處,在20-25℃室溫下,準備進行顯微操作。具體操作前,首先取10枚卵母細胞置于15L含3%suerose的HEPES-CZB操作滴中備用;然后將2.5μL精子溶液與5pLHEPES-CZB+12%PVP-360操作滴充分混合;再將單個精子從尾部吸入注射針,用Piezo脈沖從頸部斷開頭和尾;連續(xù)剪切5個精子后,將吸入全部精子頭的注射針轉移到放置卵母細胞的操作滴中,準備將精子頭逐個注射至卵母細胞質中。注射時,從時鐘9點的方向吸住卵母細胞,使紡錘體保持在6點或12點的位置,從3點的方向輕輕進針,同時用Piezo脈沖擊穿透明帶,將透明帶碎片吹出注射針的同時,將精子頭吹至針尖處,繼續(xù)進針,直至針尖插入卵母細胞深處,幾乎貼近對側質膜時,用Piezo弱脈沖擊穿卵母細胞質膜,將精子頭吐出,回吸注入卵內多余的操作液,輕輕退針,完成一次注射。依次操作,盡快實現(xiàn)該批卵母細胞的注射,室溫放置5min,然后用大量CZB溶液洗滌ICSI胚胎,并且移入CO?箱培養(yǎng)。依法進行第二批卵母細胞的精子頭注射,在注射HCG后17h,完成全部卵母細胞的精子注射。北京Piezo Micro Manipulator壓電單精子胞漿內注射